產(chǎn)品中心
PRODUCT CENTER
一步法脫落細胞DNA純化試劑盒
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貨號 |
產(chǎn)品名稱(chēng) |
規格 |
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AS101 |
BcMag ? 一步法脫落細胞DNA純化試劑盒 |
50 preps |
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AS102 |
BcMag ? 一步法脫落細胞DNA純化試劑盒 |
10 preps |
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組件 |
存儲條件 |
50preps，目錄號AS101 |
100 preps，目錄號AS102 |
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BcMag? U-DNA Beads |
4°C |
2.5 ml |
5.0 ml |
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10x Lysis Buffer (100mM Tris-HCl, PH 9.0) |
4°C |
0.6 ml |
1.2 ml |
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Proteinase K |
-20°C |
12.5 mg |
25 mg |
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DTT(1M) |
-20°C |
15.4 mg |
30.8 mg |
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Proteinase K Suspension Buffer |
4°C |
1.0 ml |
2.0 ml |
運輸和儲存：根據上表，在收到商品時(shí)儲存試劑盒中各組分。
使用我們的一步法脫落細胞 DNA純化試劑盒，可以快速輕松地從脫落細胞樣品中提取高質(zhì)量的DNA。簡(jiǎn)單的方案，可靠的結果和簡(jiǎn)單的操作使其成為您脫落細胞DNA提取需求的完美選擇。
簡(jiǎn)介
脫落細胞DNA是指從丟失的皮膚細胞和其他生物材料中收集的DNA，這些生物材料通常指手指、手掌、腳趾和腳掌上的指紋突起部位留在觸摸表面的脫落細胞。這一生物技術(shù)在盜竊、性暴力到謀殺等一系列刑事案件的取證中起著(zhù)極為重要的作用。例如，在謀殺或性侵犯案件中，可以通過(guò)研究用于盜竊的車(chē)輛的方向盤(pán)，或在謀殺和性侵案件中的武器和衣物，來(lái)收集非常有價(jià)值的犯罪者的DNA證據。此外，從犯罪現場(chǎng)收集“脫落細胞DNA”以確定犯罪嫌疑人可能非常有價(jià)值，特別是在沒(méi)有其他類(lèi)型的證據的情況下。
通常，DNA分析過(guò)程始于從法醫檢樣中提取DNA。DNA的提取和回收過(guò)程是DNA分析過(guò)程中最關(guān)鍵的一步。幾乎所有的實(shí)驗都需要足夠數量的，經(jīng)過(guò)定量和定性的DNA才可以完成。因此在法醫鑒定中，DNA鑒定能否成功取決于現有DNA模板的可用性。所以，就需要更好的DNA提取回收方法，尤其是在處理含有微量DNA的脫落細胞樣本時(shí)。各種各樣的方法被用來(lái)增加證據DNA的數量和質(zhì)量。然而，由于提取方式的不同和定量方法的準確性差異，DNA提取過(guò)程可能導致初始脫落細胞含有的DNA的20%至90%損失掉。而且，目前用于法醫DNA案件的純化技術(shù)耗時(shí)且過(guò)程繁瑣。
此外，對于使用純化柱進(jìn)行純化操作的方式很容易導致DNA丟失，從而使低拷貝或受損的脫落細胞樣本的分型實(shí)驗失敗。因此，直接PCR擴增法被提出作為避免脫落細胞樣本DNA丟失的方法之一。該技術(shù)不需要提取、定量和濃縮等步驟，可以最大程度保留生物樣本中的DNA。同時(shí)，可以最大程度減少不同的實(shí)驗室員操作帶來(lái)的誤差和樣本處理過(guò)程中的DNA污染，并減少樣本操作過(guò)程的處理時(shí)間和成本。然而，許多DNA樣本需要直接從固體物質(zhì)上提取，如衣服、室內裝潢材料、紙張、口香糖和煙頭等，但直接從這些固體上提取核酸，就會(huì )造成提取出的DNA攜帶高濃度的PCR抑制劑。Bioclone公司開(kāi)發(fā)了一種全新的基于磁珠法的一步DNA純化系統，可以克服以上這些缺點(diǎn)。
BcMag? One step Touch DNA Direct Kit使用新型負相色譜磁珠，可以從大多數微量脫落細胞樣本中快速提純出更高質(zhì)量和更高回收率的DNA。這些樣本包括體液、污漬、體液拭子、脫落細胞、煙頭、毛囊、指甲刮屑、上皮細胞、咬痕、精液等掉落的生物體細胞DNA樣本等。經(jīng)過(guò)特殊設計的磁珠表面具有我們專(zhuān)有的表面化學(xué)功能基團，一旦與樣品混合，可同時(shí)裂解細胞并捕獲PCR抑制劑（圖1）。
然后用磁力架去除磁珠-PCR抑制劑的復合物，同時(shí)保留在溶液中的純凈DNA可用于下游STR分析。本款核酸純化試劑盒提供了一種全新的快速簡(jiǎn)單的DNA純化方法，只需一個(gè)試管，無(wú)需反復的溶液轉移，純化過(guò)程不需要載體RNA。同時(shí)，這種核酸提取方式還減少了DNA丟失的風(fēng)險，以及提取緩沖液在傳統核酸提取的，結合-洗滌-洗脫程序中可能帶來(lái)的污染和DNA丟失風(fēng)險。在將樣本完全裂解后，它能夠在不到15分鐘的時(shí)間內處理96個(gè)樣品，實(shí)際手動(dòng)操作時(shí)間不會(huì )超過(guò)1分鐘。
圖2： 脫落細胞 DNA純化的原理和工作流程
1.向生物樣品中添加功能磁珠。
2.將樣品與磁珠和蛋白酶K混合并裂解細胞。
3.通過(guò)旋渦/移液吹吸方式對磁珠進(jìn)行混合，以捕獲PCR抑制劑。
4.用磁力架沉淀磁珠。
5.吸取含有純凈DNA的上清液
應用方向
純化的DNA適用于敏感的下游應用，如PCR、qPCR、單核苷酸多態(tài)性（SNP）、短串聯(lián)重復序列（STR）基因分型、基因分型或新一代測序（NGS）。
特點(diǎn)及優(yōu)勢
l 快速高效的純化方案：無(wú)需液體轉移，只需一個(gè)試管，無(wú)需事先分離DNA，可直接用于放大實(shí)驗的工作流程。
l 節約時(shí)間成本：可在不到一小時(shí)內處理96個(gè)樣本。
l 最高的核酸回收率：提取過(guò)程中的DNA損失最小。
l 有效去除抑制劑（圖1）：多酚化合物、腐殖酸/黃腐酸、酸性多糖、鞣質(zhì)、黑色素、肝素、洗滌劑、牛仔布染料、二價(jià)陽(yáng)離子，如Ca2+、Mg2+等。
l 性?xún)r(jià)比高：無(wú)需離心柱、過(guò)濾器、不用反復的重復移液和使用有機試劑。
l 可用于高通量實(shí)驗：與許多不同的全自動(dòng)核酸提取系統兼容。
本產(chǎn)品用于法醫學(xué)、人類(lèi)鑒定和親子鑒定分子生物學(xué)應用。本產(chǎn)品不適用于疾病診斷、預防或治療。
一般參考文獻
1. Van Oorschot, R., Jones, M. DNA fingerprints from fingerprints. Nature 387, 767 (1997).
2. Tang J, Ostrander J, Wickenheiser R, Hall A. Touch DNA in forensic science: The use of laboratory-created eccrine fingerprints to quantify DNA loss. Forensic Sci Int Synerg. 2019 Oct 23;2:1-16.
3. Jo-Anne Bright, Susan F. Petricevic. Recovery of trace DNA and its application to DNA profiling of shoe insoles, Forensic Science International,Volume 145, Issue 1, 2004,Pages 7-12
4. Tang J, Ostrander J, Wickenheiser R, Hall A. Touch DNA in forensic science: The use of laboratory-created eccrine fingerprints to quantify DNA loss. Forensic Sci Int Synerg. 2019 Oct 23;2:1-16.
