產(chǎn)品中心
PRODUCT CENTER
快速內毒素清除試劑盒
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貨號 |
產(chǎn)品名稱(chēng) |
產(chǎn)品規格 |
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MKE101 |
BcMag? 快速內毒素清除試劑盒 試劑盒組分： 2ml：快速內毒素清除磁珠 10ml：10*再生緩沖液 |
2 ml試劑盒 |
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MKE102 |
BcMag? 快速內毒素清除磁珠 |
5 ml |
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MKE103 |
10*再生緩沖液 |
20ml |
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Specificities |
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組成 |
表連接有多粘菌素B的超順磁珠 |
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磁化強度 |
~60 EMU/g |
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磁化類(lèi)型 |
超順磁 |
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有效濃度 |
2.5 g/ml |
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濃度 |
50 mg/ml ( d2H2O ) |
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結合能力 |
≥ 9,995 EU (內毒素單位) / ml |
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儲存 |
室溫運輸，收到后保存在 4°C . |
內毒素，又叫做脂多糖（LPS），是一種具有復雜分子結構的熱原。它最內層核心區域由疏水性脂肪酸基團組成，中部和最外層區域由親水性多糖組成（圖1）。它們是組成革蘭氏陰性細菌病原體（如大腸桿菌、沙門(mén)氏菌、志賀菌、假單胞菌、奈瑟菌、流感嗜血桿菌、百日咳桿菌和霍亂弧菌）細胞壁外膜的一部分。它們在細菌細胞破壞（死亡、細胞溶解）后釋放到血液循環(huán)中。
圖一：內毒素結構
內毒素是生物產(chǎn)品中發(fā)現的主要污染物，它是引發(fā)生物效應研究產(chǎn)生不利影響主要成分物質(zhì)。在生物技術(shù)行業(yè)中，革蘭氏陰性菌（如大腸桿菌）被廣泛用于生產(chǎn)重組類(lèi)產(chǎn)品，如蛋白質(zhì)、質(zhì)粒DNA和疫苗等。這些產(chǎn)品在生產(chǎn)過(guò)程中非常容易被內毒素污染。去除生物產(chǎn)品中的內毒素是非常關(guān)鍵的步驟，因為它會(huì )導致多種病理性生理效應，如發(fā)熱、顫抖、感染性休克、中毒性肺炎和呼吸系統癥狀。
去除內毒素是蛋白質(zhì)或DNA純化過(guò)程中最具挑戰性的下游過(guò)程之一。目前，有幾種方法可用于減少生物樣品制劑的內毒素污染，包括親和色譜法，如固定化多粘菌素B、L-組氨酸和聚L-賴(lài)氨酸；陰離子交換色譜法；凝膠過(guò)濾；超濾；蔗糖梯度離心和Triton X-114液相分離。這些技術(shù)在減少生物樣品內毒素污染方面的成功與否在很大程度上取決于目標分子的性質(zhì)。例如，超濾和離子交換色譜法是去除內毒素污染物的常用技術(shù)。雖然超濾可以有效地去除水中的內毒素，但它不適用于蛋白質(zhì)溶液樣品，因為強大的外力因素會(huì )損壞蛋白質(zhì)結構。而使用陰離子交換方法可以有效地去除內毒素，但因為目標生物分子也會(huì )被吸附而導致生物樣品的回收率降低。目前，市場(chǎng)上銷(xiāo)售的許多內毒素去除產(chǎn)品都是由傳統色譜基質(zhì)制成，如瓊脂糖樹(shù)脂或色譜柱。使用這些材質(zhì)的純化產(chǎn)品使得內毒素去除過(guò)程繁瑣、耗時(shí)，無(wú)法對微量生物樣品進(jìn)行處理，并且難以適應自動(dòng)化設備。Bioclone公司開(kāi)發(fā)出一種非常高效的基于磁珠的內毒素去除系統來(lái)克服這些問(wèn)題。
BcMag? Quick Endotoxin Removing Resin是一種共價(jià)鏈接有高密度，多聚混合素B的磁性微球。本款產(chǎn)品是專(zhuān)門(mén)為快速去除各種生物樣品中的內毒素而設計的。多粘菌素B是一種多肽類(lèi)抗生素，對大多數內毒素的脂質(zhì)a部分具有非常高的結合力。本款磁珠兼具了親和蛋白純化的特點(diǎn)（低成本、操作簡(jiǎn)單、高特異性和大容量）和具有磁性的優(yōu)勢，可以實(shí)現高效的手動(dòng)或自動(dòng)高通量快速去除內毒素過(guò)程。
操作流程
用磁性微粒進(jìn)行純化過(guò)程非常簡(jiǎn)單（圖2）。只需要將磁珠與樣品混合，并連續旋轉培養足夠的時(shí)間就可以完成純化。在混勻過(guò)程中，磁珠保持懸浮在樣品溶液中，使內毒素與磁珠表面被固定的多粘菌素B充分結合。孵育完成后，沉淀磁珠，使用磁力分離架將其與樣品分離。將無(wú)內毒素上清液轉移至新試管中。
圖2 ：內毒素清除過(guò)程
