產(chǎn)品中心
PRODUCT CENTER
一步法PCR純化試劑盒
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貨號 |
產(chǎn)品名稱(chēng) |
產(chǎn)品規格 |
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AP101 |
BcMag? 一步法PCR純化試劑盒 |
1 ml |
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AP102 |
BcMag? 一步法PCR純化試劑盒 |
5 ml |
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簡(jiǎn)介
通過(guò)去除擴增酶，核苷酸，引物和緩沖液成分，PCR產(chǎn)物純化過(guò)程對于成功的下游應用至關(guān)重要。PCR產(chǎn)物純化有幾種方式，包括用PEG或苯酚-氯仿提取沉淀，然后進(jìn)行乙醇沉淀，這種方式雖然成本較低，但耗時(shí)且容易丟失DNA樣品。其他方式包括基于磁珠或離心柱的純化，是一種廣泛使用且有效的方法，盡管它需要費力的結合-清洗-洗脫過(guò)程，并且涉及使用化學(xué)物質(zhì)，如高濃鹽溶液和乙醇，增加了殘留和下游應用干擾的風(fēng)險。
最近，酶純化是一種替代方法，它使用核酸外切酶I消化過(guò)量的引物，以及使用堿性磷酸酶以使反應中的核苷酸去磷酸化。這種方法的缺點(diǎn)是它不能消除聚合酶，二價(jià)離子（Mg2+），脫氧核苷酸和其他成分?？傊?，上述PCR純化方法具有以下局限性：
?不適用于高通量處理，難以自動(dòng)化（離心柱）。
?手動(dòng)處理樣品可能很費力，并可能導致樣品損失，產(chǎn)量降低和提取失敗。
?高濃度鹽溶液和乙醇可能被帶入洗脫的DNA中并抑制聚合酶擴增。
?不能完全去除小于50 bp的DNA片段。
?純化方案繁瑣且耗時(shí)，無(wú)法消除聚合酶，二價(jià)離子（Mg2+），脫氧核苷酸和其他成分。
為了解決這些限制，Bioclone開(kāi)發(fā)了一種新的一步法PCR純化方法。
BcMag ? 一步法PCR純化試劑盒是獨特設計的，用于快速，高效純化PCR反應體系或者其他DNA反應的磁珠類(lèi)產(chǎn)品。純化過(guò)程不僅簡(jiǎn)單（如圖一所示僅需一管，一步），而且可非常靈活的清除不同大小的DNA片段通過(guò)調整樣品的處理時(shí)間，緩沖液的pH和去垢劑的濃度。將磁珠直接添加到反應完成的PCR體系或者其他DNA反應體系中，通過(guò)渦旋將雜質(zhì)和磁珠結合并清除（例如：多余的引物，二聚體，接頭分子，鹽，去垢劑，dNTPs，以及酶類(lèi)）。渦旋過(guò)后，磁珠被磁座吸附，同時(shí)上清液中包含已純化的核酸樣品。僅需1分鐘，被純化的DNA可用于下游應用，例如桑格測序，限制酶切，克隆，SNP檢測，或者NGS文庫準備。該磁珠可以在不到10分鐘的時(shí)間內同時(shí)處理96個(gè)樣品。
特點(diǎn)和優(yōu)勢：
l 簡(jiǎn)單的過(guò)程：不用移液，一步，一管
l 超快純化過(guò)程：一分鐘可以完成純化
l 超高的純度和回收率：回收率> 90%
l 高效的清除效率：可以清除過(guò)量的引物 (<100 mers ssDNA),二聚體，接頭分子，鹽
如 Mg2+，洗滌劑，dNTPS,各種酶，以及熒光物質(zhì)。
l 無(wú)需純化柱，以及過(guò)濾器，不用費力的反復移液吹吸，也不使用酒精。
l 高通量：可兼容多種不同的自動(dòng)化液體處理系統
