產(chǎn)品中心
PRODUCT CENTER
一步法桑格測序純化試劑盒
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貨號 |
產(chǎn)品名稱(chēng) |
產(chǎn)品規格 |
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AI101 |
BcMag ? 一步法測序純化試劑盒 |
1ml |
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AI102 |
BcMag ? 一步法測序純化試劑盒 |
5ml |
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收到產(chǎn)品后，在4°C下可保存6個(gè)月。
使用一步法桑格測序純化試劑盒，可消除污染物并簡(jiǎn)化DNA測序過(guò)程。
導言
桑格測序，也稱(chēng)為“鏈終止子測序”，是一種DNA測序方法，它依賴(lài)于DNA聚合酶在體外DNA復制過(guò)程中選擇性摻入熒光標記的（bigdye終止子）雙脫氧核苷酸鏈終止子，用于單個(gè)測序反應。鏈終止PCR產(chǎn)生不同長(cháng)度的DNA片段，每個(gè)片段以熒光標記的雙脫氧核苷為尾端。鏈終止PCR的功能類(lèi)似于標準PCR，但有一個(gè)關(guān)鍵不同點(diǎn)。與常規PCR不同的是，經(jīng)過(guò)修飾的核苷酸的添加比例較低，且與正常dNTP一起加入反應體系中，參與反應。這些經(jīng)過(guò)修飾的dNTP被稱(chēng)為雙脫氧核苷（ddNTP），并且其上連接有熒光染料作為熒光標記。這種方法很快成為各種應用中最常用的測序方法，包括從頭測序，突變發(fā)現及確認，以及全基因組測序。
循環(huán)測序反應后，有必要從DNA合成產(chǎn)物中去除雜質(zhì)（例如，未反應的熒光染料，殘留的無(wú)機鹽，dNTP，引物和酶）。這些雜質(zhì)，例如染料峰或“染料斑點(diǎn)”，經(jīng)常會(huì )干擾測序數據的質(zhì)量和信號強度，造成測序色譜圖的部分模糊，并干擾測序分析工具的堿基檢出準確性。為了純化測序反應產(chǎn)物，目前市場(chǎng)上有許多染料終止劑去除（測序純化）產(chǎn)品可供選擇。但是，這些測序純化方案要么耗時(shí)（例如，使用離心柱，乙醇沉淀和SPRI超順磁珠），要么由于蛋白質(zhì)沉淀，幾個(gè)液體轉移操作和漫長(cháng)的過(guò)程而導致樣品丟失。
BcMag ? 一步測序純化試劑盒使我們特殊設計的，用于快速有效地純化桑格測序反應的產(chǎn)品。整個(gè)方案只需要一個(gè)試管，不到5分鐘就可完成實(shí)驗（圖1）。僅需將磁珠直接添加到完成的測序反應液中，通過(guò)渦旋以捕獲雜質(zhì)（例如，未反應的熒光染料，殘留的無(wú)機鹽，dNTP，引物和酶）。渦旋后，磁珠被磁力分離器捕獲，而干凈的上清液可以直接加載到毛細管測序儀上。
特點(diǎn)和優(yōu)勢：
l 一個(gè)試管，3分鐘過(guò)程，不會(huì )造成樣品流失
l 可靠的實(shí)驗結果：無(wú)論長(cháng)片段還是短片段，Q20讀取長(cháng)度> 800 bases
l 性?xún)r(jià)比高：可極大的減少實(shí)驗成本，及減少耗材的使用，如吸附柱，過(guò)濾器，酒精等，也不用重復的使用移液器抽吸。
l 高通量：可兼容多種不同的自動(dòng)化液體處理系統
l 可與BigDye XT核酸運行系統兼容，如不需要將磁珠從試管清除，上清液可以直接裝載到毛細管測序器上。
l 可以高效的去除任何染料
