產(chǎn)品中心
PRODUCT CENTER
單體親和素磁珠
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貨號 |
產(chǎn)品名稱(chēng) |
產(chǎn)品規格 |
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MMI 101 |
BcMag ? 單體親和素磁珠試劑盒 – 2.0 ml BcMag? 單體親和素磁珠 – 20 ml 10x封閉/洗脫緩沖液 – 25 ml 10x再生緩沖液 – 50 ml 10x PBS 緩沖液 |
一個(gè) |
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MMI 102 |
BcMag? 單體親和素磁珠 |
5ml |
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MMI 103 |
BcMag? 單體親和素磁珠 |
10ml |
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如需大量訂購，請聯(lián)系我們報價(jià)！ |
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產(chǎn)品屬性 |
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磁珠大小 |
直徑~ 2.5 μm |
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磁珠密度 |
~1.47 x 108 beads/mg ( 2.5μm) |
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磁力大小 |
~40 EMU/g |
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磁化類(lèi)型 |
超順磁性 |
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穩定性 |
短期儲存: pH 3-11;長(cháng)期儲存: pH 4-10 |
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結合能力 |
~ 1 mg 生物素化 BSA / ml磁珠 |
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儲存 |
4℃儲存 |
BcMag? Monomer Avidin Magnetic Beads是一種高度均勻的超順磁性微球，表面包裹著(zhù)高密度的超純（>97%）亞單位單體親和素。單體親和素源自天然四聚體蛋白，它保留了與天然親和素相同的生物素結合特異性，但其生物素結合親和力會(huì )有顯著(zhù)降低（kD=~10-8 M）。因此，通過(guò)使用溫和的洗脫條件，例如含有2 mM生物素的緩沖液，就可以很容易地從單體親和素中洗脫結合的生物素化分子，而不需要變性緩沖試劑，如8M鹽酸胍或SDS去垢劑等苛刻的洗脫試劑。本款磁珠經(jīng)過(guò)專(zhuān)門(mén)設計、測試和質(zhì)量控制，可用于免疫沉淀、細胞分選，以及從細胞裂解液或雜交反應中快速一步捕獲生物素化分子，如DNA、RNA、抗體或蛋白質(zhì)。
親和素（或鏈霉親和素）和生物素之間表現的相互作用，是已知的非共價(jià)相互作用最高的一種。親和素、鏈霉親和素、單體親和素及其類(lèi)似物已成為探針研究實(shí)驗中強大的親和配體工具，被廣泛應用于生化分析、診斷、親和純化和藥物遞送。
特點(diǎn)和優(yōu)勢
· 快捷，簡(jiǎn)單的一步法高通量操作;無(wú)需純化柱或過(guò)濾器，或重復移液、離心等操作（圖1）
· 極高的結合能力，在溫和的條件下洗脫結合的生物素化分子
· 在溫和的洗脫條件下純化生物素化樣品
· 極小的非特異性結合
· 對樣本體積要求低，便于自動(dòng)化操作
· 成本低：只有市場(chǎng)同類(lèi)產(chǎn)品磁珠價(jià)格的一半
· 磁珠至少可以重復使用5次
材料要求
緩沖液
· 1x PBS Buffer (0.1 M 磷酸鈉, 0.15 M氯化鈉; pH 7 )
· 1x Regeneration Buffer (0.1 M Glycine/HCl,pH 2.8)
· 1x Blocking/Elution Buffer (2 mM D-生物素溶于 PBS)
l 磁力分離器（適用于手動(dòng)操作）：根據實(shí)驗時(shí)生物樣品的體積，使用者可以選擇一下不同型號的磁力分離器：
l BcMag? separator-2可以容納兩個(gè)單獨的1.5 ml離心管(Cat.# MS-01);
l BcMag? separator-6可以容納六個(gè)單獨的1.5 ml離心管(Cat.# MS-02);
l BcMag? separator-24可以容納24個(gè)單獨的1.5-2.0 ml離心管(Cat.# MS-03);
l BcMag? separator-50可以容納一個(gè)單獨的50 ml離心管，一個(gè)15ml的離心管，以及四個(gè)1.5ml離心管(Cat.# MS-04);
l BcMag? separator-96 可以配合96 ELISA板使用 (Cat.#MS-06).
操作過(guò)程
操作過(guò)程中實(shí)驗體積可根據需要放大或者縮小
提示：在純化生物素化蛋白質(zhì)、多肽和其他分子之前。用戶(hù)應將試劑盒中的所有試劑溫度平衡至室溫，并用雙蒸餾水配制1x工作溶液。
1.輕輕震動(dòng)裝有磁珠的試劑瓶，直到磁珠完全懸浮。將50μl磁珠轉移到新試管中。
提示：客戶(hù)應根據每個(gè)實(shí)驗粗樣品中生物素化分子的數量，根據經(jīng)驗確定最佳的磁珠使用量。過(guò)多的磁珠會(huì )導致背景更高；磁珠使用量少會(huì )造成產(chǎn)量降低。我們建議純化50μg生物素化分子添加50μl完全懸浮的磁珠。
2. 將試管放在磁力分離器上1分鐘。當磁珠完全沉淀時(shí)，去除上清液。取下試管加入四倍磁珠體積的d2H2O，充分混合。并將試管再次置于磁力分離器上1分鐘，完全去除上清液。
3. 按照步驟2所述方式，用四倍磁珠體積的1x PBS緩沖液清洗磁珠。
4. 加入三倍磁珠體積的1xBlocking / Elution Buffer，通過(guò)渦旋充分混合，并在室溫下培養5分鐘。將試管放在磁力分離器上1分鐘。完全去除上清液。
5. 加入六倍磁珠體積的1xRegeneration Buffer，通過(guò)渦漩充分混合，并將試管放在磁力分離器上1分鐘。完全去除上清液。
6. 加入四倍磁珠體積的1x PBS Buffer，并按照步驟2所述方式清洗磁珠。這些磁珠可以隨時(shí)使用。
提示：必須立即使用磁珠，否則粘合能力將顯著(zhù)降低。
7. 向磁珠中加入含有生物素化分子的樣品，通過(guò)移液器吹吸充分混合，并在室溫下緩慢旋轉培養30-60分鐘。
8. 將試管放在磁力分離器上，保持試管留在分離器上的同時(shí)去除上清液。如步驟2所示，用1x PBS清洗磁珠，直到在280 nm處洗脫液的吸光度接近背景水平（OD 280<0.05）。
9. 加入一倍磁珠體積的Blocking/Elution Buffer，通過(guò)移液器吹吸充分混合，并在室溫下培養5-10分鐘，將與磁珠結合的生物素化分子洗脫下來(lái)。
